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Quantifizierung und Qualifizierung von DNA/RNA/Protein
Einführung Der Quantifizierungs- und Reinigungstest der Proben ist die Voraussetzung, die Ihnen bei der Entscheidung hilft, ob wir sie in nachgelagerten Experimenten verwenden können. Mit der Familie der SHST-Spektrophotometer können Sie schnell beurteilen, ob Ihre Proben das enthalten, was Sie erwarten, und zwar in angemessenen Mengen. Die Kernfunktionen der SH-Nano-Serie sind die Quantifizierung und Reinheit der Nukleinsäuren und Proteine, die für die nachfolgenden Experimente und Anwendungen unverzichtbar sind.
Funktionsprinzipien eines Spektralfotometers:
Nukleinsäuren (einschließlich DNA und RNA) haben die Eigenschaft, ultraviolette Strahlung zu absorbieren.Die Absorptionswellenlänge von Nukleinsäuren beträgt 260 nm.Nach der Theorie von Lambert Beer kann aus dem Extinktionskoeffizienten einer bestimmten Substanz und der Dicke der Flüssigkeitsschicht die Konzentration der Substanz aufgrund ihrer Absorption berechnet werden.Mittlerweile kann die Reinheit von Nukleinsäuren auch durch die Berechnung des Verhältnisses von A260/A280 und A260/A230 abgeschätzt werden.(Die 280-nm-Absorption stammt normalerweise von Proteinen, während die 230-nm-Absorption typischerweise von Zuckern und Phenolen stammt.)
Quantifizierung
Der Messwert der SH-Nano-Serie ist die Konzentration der Probe in ng/µL.Da die SH-Nano-Serie ultraviolette Absorption bietet, sind die Quantifizierungsfähigkeiten schlechter als bei unserem Fluorometer (SH-FD100), das die fluorimetrischen Methoden anwendet.Daher wird empfohlen, Proben mit mehr als 10 ng/µL Nukleinsäuren zu messen.(Klicken Sie hier, um weitere Informationen zum Fluorometer SH-FD100 zu erhalten)
Reinheit
Die Bestimmung der Reinheit der Proben ist ein sehr wichtiger Zweck des Spektrophotometers.Dies wird im Allgemeinen in zwei Verhältnissen angegeben: 260/280 und 260/230.Diese Zahlen entsprechen der Absorption bei den Wellenlängen 230, 260 und 280 nm.
Das Verhältnis 260/280 gibt einen Hinweis darauf, wie rein die Probe von verunreinigenden Proteinen ist.Da Proteine bei 280 nm absorbieren, weist ein niedriges Verhältnis von 260/280 auf das Vorhandensein hoher Proteinmengen im Vergleich zu Nukleinsäuren hin.
Das optimale Verhältnis 260/280 hängt von den Proben ab: RNA oder DNA.
Diese Werte lauten wie folgt:
DNA: 1,80 RNA: 2,00 Das Verhältnis 260/230 ist ein Wert, der angibt, wie rein die Probe von Salzen und anderen Verunreinigungen ist, die bei 230 nm absorbieren können. Reine Nukleinsäureproben haben ein 260/230-Verhältnis von 2 oder mehr. Alles unter 2 deutet darauf hin, dass die Stichprobe noch andere Faktoren enthält.
Fluorometer (SH-FD100)
Wann sollten wir Fluorometer verwenden? Wir verwenden vor allem dann ein Fluorometer (SH-FD100) anstelle eines Spektrophotometers (SH-NanoOne), wenn die Proben sehr geringe Konzentrationen an Nukleinsäuren aufweisen.Die Empfindlichkeit unseres SH-FD100 kann bis zu 10 pg/ml betragen, was der des SH-NanoOne überlegen ist.
Die Mächtigen SH-NanoOne PLUS
SH-NanoOne Plus bietet visuell-ultraviolette, fluorimetrische Methoden sowie dynamische Assays im OD600-Modus. Es handelt sich um einen multifunktionalen Konzentrationsdetektor für ein Life-Science-Labor, der verschiedene Anforderungen erfüllen kann. SH-NanoOne Plus kann Nukleinsäurekonzentrationen von bis zu 37.500 ng/ul erkennen und verfügt im Vergleich zu SH-NanoOne über zwei zusätzliche Pfadlängenoptionen, die auf unterschiedliche Anforderungen zugeschnitten sind. Der eingebaute Drucker erleichtert das Erstellen einer Papiernotiz mit Ergebnissen.
Shenhua Science Technology Co., Ltd.(SHST) mit Hauptsitz in der Stadt Hangzhou ist ein chinesisches High-Tech-Unternehmen, das sich der Forschung und Entwicklung sowie der Produktion von Laborinstrumenten widmet.
